欧美视频亚洲色图-欧美视频在线一区二区三区-欧美视频在线观看一区二区-欧美视频在线免费播放-亚洲视频福利-亚洲视频高清

PRODUCTS
產品中心
  • ELISA試劑盒
  • 細胞
  • 質粒
  • 標準品
  • PCR基因檢測試劑盒
  • 生化試劑
  • 生化檢測試劑盒
  • 抗體
  • 細胞系
  • 原代細胞
  • 細胞培養基
  • 細胞分析
  • 中藥標準品
  • 技術文章/ARTICLES

    首頁   >    技術文章   >   細胞介導細胞毒作用檢測法

    細胞介導細胞毒作用檢測法

    點擊次數:1127  更新時間:2015-11-16

    (一)原理

        以NK細胞為例。將待測者外周血中的NK細胞與靶細胞(K562細胞)按一定比例混合培養一定時間,NK細胞作用于靶細胞,使靶細胞被殺死、破壞,進而使靶細胞線粒體內的乳酸脫氫酶釋放出來.使底物發生顏色變化,其顏色深淺與酶的釋放量成正比,檢測顯色后的光密度OD值,便可推算出NK細胞的殺傷活性。

    (二)材料

    1.待檢者肝素抗凝血,靶細胞為K562細胞。

    2.RPMI 1640培養液、淋巴細胞分離液。

    3.酶標儀、離心機。

    (三)方法

    1.用含5%小牛血清的RPMI 1640培養液將靶細胞調整到5×104~2×105/ml,此濃度需根據情況預先標定。

    2.取待檢者肝素抗凝血3~5ml,經淋巴細胞分離液分離單個核細胞,為效應細胞。

    3.在96孔圓底細胞培養板中加入靶細胞,每孔加100μl。3個效應細胞自然釋放對照孔不加靶細胞.只加100μl培養液。

    4.向各孔加:100μl效應細胞,效應細胞與靶細胞的比例根據要求而定,通常為5:l~20:1。自然釋放孔不加效應細胞只加100μl培養液,zui大釋放孔中加100μl1%NP40。每個實驗設3個復孔。

    5.置37℃5%CO2的培養箱中培養4~6h。

    6.離心培養板1000r/min離心10min。每孔吸出150μl上清液.對應加入另一塊96孔酶聯檢測板中。向第二塊板每孔依次加20μl O.4mol/L乳酸溶液、20ml 4mmol/L 2一p一碘苯酯一3一p一氯化硝基苯四唑,20μl反應液[含O.03%BSA.2.7U/m1硫辛酰胺脫氫酶.4.5mmol/L氫化型輔酶I(NAD+ ),1.2%蔗糖的PBS],室溫中放置20min。

    7.在酶聯檢測儀上測定各孔的光密度(OD值),檢測波長492nm,參考波長650nm;

    關注我們:

    © 2025 上海一研生物科技有限公司版權所有  備案圖標.png滬ICP備14030958號-14    管理登陸    技術支持:化工儀器網    GoogleSitemap

    主站蜘蛛池模板: 欧美一级毛片100部 欧美一级毛片aaaaa | 日本免费大黄在线观看 | 亚洲黄色免费网址 | 成人欧美一区二区三区在线 | 久久久精品久久 | 欧美日韩一区二区三区在线 | 91精品国产免费久久久久久 | 日韩免费观看一级毛片看看 | 欧美日韩国产一区二区三区播放 | 亚州精品视频 | 午夜三级国产精品理论三级 | 日本乱理伦片在线观看网址 | 一本色道久久99一综合 | a天堂中文在线官网 | 亚洲日本va午夜中文字幕一区 | 日本特爽特黄特刺激大片 | 日本一区视频在线观看 | 日韩一区二区三区四区不卡 | 欧美三级aaa | 日韩一区二区三区在线播放 | 视频精品一区 | 国产精品网站 夜色 | 国产精品一区久久 | 国产三级做爰高清视频a | www中文字幕在线观看 | 欧美性毛片大片 | 午夜免费69性视频爽爽爽 | 碰碰碰精品视频在线观看 | 孕妇交 | 日本成人一级片 | 成年人一级片 | 国产精品合集久久久久青苹果 | 成人福利在线 | 成人国产网站v片免费观看 成人国产午夜在线视频 | 国产乱码精品一区二区三上 | 成年男女免费视频网站 | 图片区偷拍区小说区 | 成人午夜视频在线观看 | 欠草视频| 九九视频高清视频免费观看 | 毛片在线高清免费观看 |