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    鯉上皮瘤細胞系(EPC)的運輸與保存

    點擊次數:270  更新時間:2025-05-20
    產品名稱:鯉上皮瘤細胞系(EPC)  
    產品類別:其他細胞系
    生長特性:貼壁生長
    培養體系:MEM+10%FBS,28°或者21°培養
    傳代方法 :1:2傳代
    細胞形態:上皮細胞樣
    規格:1×10^6cells/T25培養瓶
    貨號:E-XB6814
    產品的運輸與保存:
    視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行:
    1.1ml凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;
    收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保持1個月。
    2.T-25培養瓶充滿完全培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
    原代細胞培養方法:
    1.準備:取各種已消毒的培養用品置于凈化臺面,紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
    2.布局:點燃酒精燈,安裝吸管帽。
    3.處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青的混合液中30~60分鐘。
    4.剪切:用眼科剪把組織切成2~3毫米大小的塊,以便于消化。加入比組織塊總量多30~50倍的液,然后一并倒入三角燒瓶中,結扎瓶口或塞以膠塞。
    5.消化:或用恒溫水浴,或置于37℃溫箱消化均可,消化中每隔20分鐘應搖動一次,如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。
    6.分離:在消化過程中見消化液發混濁時,可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察,如組織已分散成細胞團或單個細胞,立即終止消化,隨即通過適宜不銹鋼篩,濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速(500~1000轉/分)離心消化液5分鐘,吸出上清,加入適量含有血清的培養液。
    7.計數:用計數板計數,如細胞懸液細胞密度過大,再補加培養液調整后,分裝入培養瓶中。對大多數細胞來說,pH要求在7.2~7.4范圍,培養液呈微紅色,如顏色偏黃,說明液體變酸,可用NaHCO3調整。
    8.培養:置于36.5℃溫箱培養,如用CO2溫箱培養,瓶蓋需擰松半圈。
     
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