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    菌液的制備分析

    點擊次數:1509  更新時間:2017-04-06

    1.費氏弧菌發光桿菌原液制備:

    菌液的制備:將合格的傷寒桿菌H菌株接種于普通瓊脂的克氏瓶或大試管內37℃孵育18—24小時。肉眼觀察有無雜菌生長,必要時作鏡檢。用無菌甲醛生理鹽水洗下菌苔,將洗下液體裝入無菌試管內,置37℃恒溫箱18—24小時以殺菌。得到原液。用作無菌試驗即將菌液接種于肉湯及瓊脂培養基培養4天,無活菌生長者才可使用。

    菌液的制備:將合格的傷寒桿菌菌株依上法培養后,用無菌0.5%石灰酸鹽水將菌苔洗下,洗液裝入無菌試管置于37℃溫箱中18—24小時殺菌得原液。經檢查無菌時可以使用(如無傷寒桿菌菌株也可用菌株制備抗原。即用0.5%石灰酸生理鹽水洗下菌液置100℃水浴60分鐘,破壞其H抗原即為O菌液。

    2.費氏弧菌發光桿菌應用液的制備:

    合格的原液用標準比濁管計算含菌落數目后,用生理鹽水稀釋至每毫升含菌10億。是為了應用液加入適量甲醛使其為0.25%,制備好的原液及應用液均保存在2—10℃冰箱中備用,有效期為1年。

    菌液濃度的計算及稀釋法:

    菌液的濃度可用標準比濁法來測定,方法如下:

    (1)分別配制1%硫酸溶液及1%氯化鋇溶液

    (2)取口徑相等質地相同的試管10支,依下表所示分別將硫酸及氯化鋇溶液加入,封固管口,費氏弧菌發光桿菌注明號碼備用。

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